KeyTec® TR-FRET Phospho-INSR β (Y1150/Y1151) Kit

    主要用于检测INSR β (Y1150/Y1151)磷酸化蛋白水平的TR-FRET检测方法

    • 简便高效:试剂盒采用均相检测,操作过程更加快速便捷 • 特异性强:试剂盒采用特异性抗体捕获INSR β (Y1150/Y1151)磷酸化蛋白,确保结果的准确性 • 数据更稳定,更适合高通量筛选
规格: 500 tests5,000 tests100 tests
价格: ¥ 17,179
货号: A1060331S
货期: 现货
KeyTec® TR-FRET Phospho-INSR β (Y1150/Y1151) Kit

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    • 简便高效:试剂盒采用均相检测,操作过程更加快速便捷 • 特异性强:试剂盒采用特异性抗体捕获INSR β (Y1150/Y1151)磷酸化蛋白,确保结果的准确性 • 数据更稳定,更适合高通量筛选
规格: 500 tests5,000 tests100 tests
货号: A1060331S
货期: 现货
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产品概述
KeyTec® TR-FRET Phospho-INSR β (Y1150∕Y1151) 检测试剂盒可检测细胞裂解后胞内磷酸化INSR β (Y1150/Y1151) 蛋白的水平。胰岛素受体 (Insulin Receptor,INSR) 是由两个α-亚基和两个β-亚基构成的跨膜糖蛋白,当胰岛素与受体胞外的α亚基结合后,引起受体胞内β亚基的酪氨酸位点(Y1150/Y1151)发生自磷酸化,随后通过磷酸化胰岛素受体底物蛋白(Insulin Receptor Substrate,IRS)激活下游的磷脂酰肌醇(Phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K),进而使蛋白激酶(Akt)上的丝氨酸以及苏氨酸位点被磷酸化激活,活化的Akt能引起许多与糖代谢相关的生物学效应。 本方法的基本原理如下图所示,一对特异性抗体分别偶联了KeyTec® TR-FRET Solar Eu*1与KeyTec® TR-FRET LA*2,一个可特异性识别磷酸化位点,另一个可识别该蛋白的其他表位;当两个抗体分别与磷酸化INSR β (Y1150/Y1151) 蛋白的不同表位结合时,TR-FRET供体与受体靠近到足够近的距离,在外部光源的激发下,供体与受体之间发生能量共振转移;检测特定波长(665 nm)的信号强度即可测定磷酸化INSR β (Y1150/Y1151) 蛋白的水平。
性能展示
在CHO-INSR细胞中,刺激INSR β蛋白Y1150/Y1151位点的磷酸化 CHO-INSR细胞(50K cells/well,双复孔)与梯度稀释的insulin溶液在室温下孵育25分钟。数据显示,使用insulin处理细胞后,会刺激INSR β在Y1150/Y1151位点的磷酸化。
CHO-INSR细胞裂解物滴定(质控测试) 质量控制:针对该试剂盒的质控方法为检测 Insulin处理的CHO-INSR细胞裂解液中磷酸化INSR β(Y1150/Y1151)的水平。在T175瓶中培养CHO-INSR细胞至密度达到80%时,用终浓度10 μg/mL的Insulin室温刺激25分钟。使用3 mL 1X裂解缓冲液D进行裂解,随后用1X裂解缓冲液D对细胞裂解物进行梯度稀释,双复孔测试。数据显示,梯度稀释裂解物与TR-FRET比值呈线性相关。
使用说明
产品说明书_A1060331_KeyTec® TR-FRET Phospho-INSR β (Y1150 ∕ Y1151) kit_VKEYBIO-01-2025.pdf
KeyTec® TR-FRET磷酸化蛋白试剂盒通用指导手册_第一版.pdf
产品组分
产品货号
产品品名
产品规格
A1060331S
KeyTec® TR-FRET Phospho-INSR β (Y1150/Y1151) Kit
500 tests
测试数(tests)是指在96孔或384孔分析板中进行实验,反应总体系为20 μL,按试剂盒推荐的浓度使用试剂时所能进行的实验测试孔数。 (详情参阅“KeyTec® TR-FRET磷酸化蛋白试剂盒通用指导手册 ”)。 • 1 vial 25 µL/vial Phospho-INSR β (Y1150/Y1151) - Solar Eu antibody • 1 vial 25 µL/vial Phospho-INSR β (Y1150/Y1151) - LA antibody • 1 vial 100 µL/vial Positive control lysate • 1 vial 400 µL/vial Phosphatase Inhibitor Cocktail (100X) • 1 bottle 8 mL/bottle Phosphoproteins Lysis Buffer D (5X) • 1 bottle 2.5 mL/bottle Phosphoproteins Detection Buffer (1X)
产品须知
分析证书
使用限制
储存条件
仅供科研使用,不可用于诊断或治疗。

-60℃ 或以下

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产品概述
KeyTec® TR-FRET Phospho-INSR β (Y1150∕Y1151) 检测试剂盒可检测细胞裂解后胞内磷酸化INSR β (Y1150/Y1151) 蛋白的水平。胰岛素受体 (Insulin Receptor,INSR) 是由两个α-亚基和两个β-亚基构成的跨膜糖蛋白,当胰岛素与受体胞外的α亚基结合后,引起受体胞内β亚基的酪氨酸位点(Y1150/Y1151)发生自磷酸化,随后通过磷酸化胰岛素受体底物蛋白(Insulin Receptor Substrate,IRS)激活下游的磷脂酰肌醇(Phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K),进而使蛋白激酶(Akt)上的丝氨酸以及苏氨酸位点被磷酸化激活,活化的Akt能引起许多与糖代谢相关的生物学效应。 本方法的基本原理如下图所示,一对特异性抗体分别偶联了KeyTec® TR-FRET Solar Eu*1与KeyTec® TR-FRET LA*2,一个可特异性识别磷酸化位点,另一个可识别该蛋白的其他表位;当两个抗体分别与磷酸化INSR β (Y1150/Y1151) 蛋白的不同表位结合时,TR-FRET供体与受体靠近到足够近的距离,在外部光源的激发下,供体与受体之间发生能量共振转移;检测特定波长(665 nm)的信号强度即可测定磷酸化INSR β (Y1150/Y1151) 蛋白的水平。
性能展示
在CHO-INSR细胞中,刺激INSR β蛋白Y1150/Y1151位点的磷酸化 CHO-INSR细胞(50K cells/well,双复孔)与梯度稀释的insulin溶液在室温下孵育25分钟。数据显示,使用insulin处理细胞后,会刺激INSR β在Y1150/Y1151位点的磷酸化。
CHO-INSR细胞裂解物滴定(质控测试) 质量控制:针对该试剂盒的质控方法为检测 Insulin处理的CHO-INSR细胞裂解液中磷酸化INSR β(Y1150/Y1151)的水平。在T175瓶中培养CHO-INSR细胞至密度达到80%时,用终浓度10 μg/mL的Insulin室温刺激25分钟。使用3 mL 1X裂解缓冲液D进行裂解,随后用1X裂解缓冲液D对细胞裂解物进行梯度稀释,双复孔测试。数据显示,梯度稀释裂解物与TR-FRET比值呈线性相关。
使用说明
产品说明书_A1060331_KeyTec® TR-FRET Phospho-INSR β (Y1150 ∕ Y1151) kit_VKEYBIO-01-2025.pdf
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KeyTec® TR-FRET Phospho-INSR β (Y1150/Y1151) Kit
500 tests
测试数(tests)是指在96孔或384孔分析板中进行实验,反应总体系为20 μL,按试剂盒推荐的浓度使用试剂时所能进行的实验测试孔数。 (详情参阅“KeyTec® TR-FRET磷酸化蛋白试剂盒通用指导手册 ”)。 • 1 vial 25 µL/vial Phospho-INSR β (Y1150/Y1151) - Solar Eu antibody • 1 vial 25 µL/vial Phospho-INSR β (Y1150/Y1151) - LA antibody • 1 vial 100 µL/vial Positive control lysate • 1 vial 400 µL/vial Phosphatase Inhibitor Cocktail (100X) • 1 bottle 8 mL/bottle Phosphoproteins Lysis Buffer D (5X) • 1 bottle 2.5 mL/bottle Phosphoproteins Detection Buffer (1X)
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