KeyTec® TR-FRET Phospho- EGFR (Y1068) 检测试剂盒可检测细胞裂解后胞内磷酸化EGFR (Y1068) 蛋白的水平。表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,简称为EGFR、ErbB-1或HER1)属于ErbB酪氨酸激酶受体家族的一种,位于细胞膜表面,与配体结合后诱导形成二聚体,从而导致内在激酶结构域的激活以及特定酪氨酸残基上的磷酸化,发生受体自磷酸化并引导下游磷酸化,包括MAPK、AKT和JNK通路,诱导细胞增殖。EGFR与肿瘤细胞的增殖、血管生成、肿瘤侵袭转移及细胞凋亡的抑制有关,是非常重要的肿瘤治疗靶点。
本方法的基本原理如下图所示,一对特异性抗体分别偶联了KeyTec® TR-FRET Solar Eu*1与KeyTec® TR-FRET LA*2,一个可特异性识别磷酸化位点,另一个可识别该蛋白的其他表位;当两个抗体分别与磷酸化EGFR (Y1068) 蛋白的不同表位结合时,TR-FRET供体与受体靠近到足够近的距离,在外部光源的激发下,供体与受体之间发生能量共振转移;检测特定波长(665 nm)的信号强度即可测定磷酸化EGFR (Y1068) 蛋白的水平。