KeyTec® TR-FRET Phospho-AKT (S473) Kit
KeyTec® TR-FRET Phospho-AKT (S473) Kit
产品概述KeyTec® TR-FRET AKT (S473) 磷酸化蛋白检测试剂盒可用于检测细胞裂解后胞内 AKT 蛋白S473位点磷酸化水平。本试剂盒是运用 KeyTec® TR-FRET 技术开发的夹心型免疫分析方法，具有简单快速、特异性高、灵敏度高、重复性好等特点。
本方法的基本原理如下图所示，一对特异性抗体分别偶联了荧光能量供体 Solar Eu*1 与荧光能量受体 LA*2，当AKT (S473) 位点发生磷酸化修饰后，两个抗体同时与 AKT 蛋白的不同表位结合，在外部光源的激发下，供体与受体之间发生能量共振转移；检测特定波长（665nm）的信号强度即可测定 AKT 蛋白S473位点磷酸化水平。
性能展示
在NIH/3T3-L1细胞中，刺激AKT蛋白S473位点发生磷酸化修饰
铺板NIH/3T3-L1细胞（30K cells/well，双复孔），加入梯度稀释的PDGF-BB在37 ℃ 孵育15分钟。TR-FRET结果显示，使用PDGF-BB处理NIH/3T3-L1细胞可刺激AKT在S473位点发生磷酸化修饰。
NIH/3T3-L1细胞裂解液滴定（质控测试）
质量控制: 针对该试剂盒质控方法为检测NIH/3T3-L1细胞裂解液(质控标准品)。在T175瓶中培养NIH/3T3-L1细胞至80-90%密度，用终浓度0.4 nM的PDGF-BB 37 ℃ 刺激15分钟。使用3 mL lysis buffer #5（Ready-to-Use）裂解细胞，随后用lysis buffer #5（Ready-to-Use）对细胞裂解物进行梯度稀释，双复孔测试。质控结果显示，梯度稀释裂解物与TR-FRET比值呈线性相关。
使用说明
产品说明书_A1060352_KeyTec® TR-FRET Phospho-AKT (S473) kit_VKEYBIO-01-2026.pdf
产品组分产品货号
产品品名
产品规格
A1060352L
KeyTec® TR-FRET Phospho-AKT (S473) Kit
5,000 tests
• 1 vial （250 µL/vial）Phospho-AKT(S473) Solar Eu & LA Abs mixture
• 2 vials （100 µL/vial）Positive control lysate
• 1 bottle 3 mL/bottle Phosphatase Inhibitor Cocktail
• 1 bottle 60 mL/bottle Phospho and Total protein Lysis Buffer #5
• 1 bottle 25 mL/bottle Phospho and Total protein Detection Buffer #5
产品须知分析证书
使用限制
储存条件
仅供科研使用，不可用于诊断或治疗。
-60℃ 或以下
产品推荐产品概述KeyTec® TR-FRET AKT (S473) 磷酸化蛋白检测试剂盒可用于检测细胞裂解后胞内 AKT 蛋白S473位点磷酸化水平。本试剂盒是运用 KeyTec® TR-FRET 技术开发的夹心型免疫分析方法，具有简单快速、特异性高、灵敏度高、重复性好等特点。
本方法的基本原理如下图所示，一对特异性抗体分别偶联了荧光能量供体 Solar Eu*1 与荧光能量受体 LA*2，当AKT (S473) 位点发生磷酸化修饰后，两个抗体同时与 AKT 蛋白的不同表位结合，在外部光源的激发下，供体与受体之间发生能量共振转移；检测特定波长（665nm）的信号强度即可测定 AKT 蛋白S473位点磷酸化水平。
性能展示在NIH/3T3-L1细胞中，刺激AKT蛋白S473位点发生磷酸化修饰
铺板NIH/3T3-L1细胞（30K cells/well，双复孔），加入梯度稀释的PDGF-BB在37 ℃ 孵育15分钟。TR-FRET结果显示，使用PDGF-BB处理NIH/3T3-L1细胞可刺激AKT在S473位点发生磷酸化修饰。
NIH/3T3-L1细胞裂解液滴定（质控测试）
质量控制: 针对该试剂盒质控方法为检测NIH/3T3-L1细胞裂解液(质控标准品)。在T175瓶中培养NIH/3T3-L1细胞至80-90%密度，用终浓度0.4 nM的PDGF-BB 37 ℃ 刺激15分钟。使用3 mL lysis buffer #5（Ready-to-Use）裂解细胞，随后用lysis buffer #5（Ready-to-Use）对细胞裂解物进行梯度稀释，双复孔测试。质控结果显示，梯度稀释裂解物与TR-FRET比值呈线性相关。
使用说明产品说明书_A1060352_KeyTec® TR-FRET Phospho-AKT (S473) kit_VKEYBIO-01-2026.pdf
产品组分产品货号
产品品名
产品规格
A1060352L
KeyTec® TR-FRET Phospho-AKT (S473) Kit
5,000 tests
• 1 vial （250 µL/vial）Phospho-AKT(S473) Solar Eu & LA Abs mixture
• 2 vials （100 µL/vial）Positive control lysate
• 1 bottle 3 mL/bottle Phosphatase Inhibitor Cocktail
• 1 bottle 60 mL/bottle Phospho and Total protein Lysis Buffer #5
• 1 bottle 25 mL/bottle Phospho and Total protein Detection Buffer #5
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仅供科研使用，不可用于诊断或治疗。
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