KeyTec® TR-FRET Human STING WT蛋白结合检测试剂盒可测定针对野生型人源STING蛋白的配体或抑制剂结合情况。本试剂盒是运用KeyTec® TR-FRET技术开发的竞争型免疫分析方法,具有简单快速、特异性高、灵敏度高、重复性好等特点。试剂盒中使用了带标签1的y野生型STING蛋白(stimulator of interferon genes protein,Tag1-STING WT)和偶联了KeyTec® TR-FRET Green*1的STING WT ligand(经过优化的高亲和力配体);可用于STING WT抑制剂或配体的高通量筛选与亲和力测定。
本方法的基本原理如下图所示,Bright Tb*2偶联的抗标签1(Tag1)抗体可特异性识别Tag1-STING WT蛋白,Green*1偶联的STING WT ligand可与STING WT蛋白结合,从而使Bright Tb和Green相互靠近,在外部光源的激发下,供体与受体之间发生能量共振转移;检测特定波长(520 nm)的信号强度即可测定STING WT ligand与STING WT蛋白之间的结合程度。当体系中无抑制剂或配体参与竞争时,信号最高;随着加入抑制剂或配体的浓度升高,信号逐渐降低;TR-FRET信号强度与抑制剂或配体的亲和力成反比。