KeyTec® TR-FRET His tag检测试剂盒可用于确认融合蛋白中的His tag能否被抗His tag抗体识别,也可用于测定带有His tag融合蛋白的相对浓度。本试剂盒是运用KeyTec® TR-FRET技术开发的竞争型免疫分析方法,具有简单快速、准确性高、重复性好、灵敏度高等特点。
本方法的基本原理如下图所示,偶联了KeyTec® TR-FRET Solar Eu*1的抗His tag抗体(Anti-His-Solar Eu)可识别并结合KeyTec® TR-FRET LA*2偶联的His tag融合蛋白(His-Protein-LA),从而使供体与受体靠近到足够近的距离,在外部光源的激发下,供体与受体之间发生能量共振转移,检测特定波长(665 nm)的信号强度即可评估结合情况;当加入带有His tag的待测样品时,其会与His-Protein-LA竞争抗体的结合位点,特定波长(665 nm)的信号随样本中游离的待测样品的浓度升高而降低。