KeyTec® Fluorescent 细胞活力检测试剂盒(简称FCV:Fluorescent Cell Viability)是一种基于荧光信号的非裂解型细胞活力检测系统。该试剂通过检测活细胞内一种保守的组成型蛋白酶的活性,快速、灵敏地实现对活细胞数量的相对定量。试剂盒包含可穿透细胞膜的荧光底物(GF-AFC,即甘氨酰-苯丙氨酰-氨基荧光香豆素),当该底物进入具有完整细胞膜的活细胞后,被细胞内的蛋白酶特异性切割,生成的产物通过外源光信号激发后可产生特定波长的荧光信号,其强度与活细胞数量成正比。当细胞膜完整性丧失时,该蛋白酶迅速失活,无法有效切割底物,因此死细胞几乎不产生荧光信号。这一机制确保了检测结果能准确地反映培养体系中活细胞数量。
该试剂盒可与大多数化学发光检测方法兼容,实现同时在同一孔内以顺序或多重模式进行多种下游指标检测(如Caspase活性检测),利用测定的活细胞数量对下游信号进行标准化处理,能有效校正孔间、板间及不同实验日之间由于细胞数量不同造成的差异,使结果更具可比性;本检测数据也可作为内部对照,用于识别由细胞聚集或化合物非特异性毒性引起的误差。本试剂盒适用于贴壁细胞与悬浮细胞,广泛应用于高通量筛选、药物毒性评估与细胞增殖研究。